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            產(chǎn)品中心您當(dāng)前的位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > PCR試劑盒 > PCR檢測試劑盒 > 50T犬血支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格
            基礎(chǔ)信息Product information
            產(chǎn)品名稱:

            犬血支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格

            產(chǎn)品簡介:

            犬血支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。

            產(chǎn)品型號:50T

            廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

            訪問量:1524

            更新時間:2024-11-04

            產(chǎn)品特性Product characteristics

            犬血支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格特異性強(qiáng)
            PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
            ①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
            ②堿基配對原則;
            ③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
            ④靶基因的特異性與保守性。

            產(chǎn)品名稱

             犬血支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格

            英文名稱

             Mycoplasma haemocanisPCR

            貨號

             YS31132-R

            原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。


             

            適用范圍【參考值】
            1.試劑盒有效性判定:
            (1)陽性對照:有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
            (2)陰性對照:Ct值>38或無Ct值,線形為直線或輕微斜線,無指數(shù)增長期。
            2.標(biāo)本結(jié)果判定:
            (1)陽性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
            (2)可疑:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測,如重復(fù)實驗結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長期,則判定為陽性,否則為陰性。
            (3)陰性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值。

            PCR實驗步驟:
            典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。
            其主要步驟是:
            將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
            人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
            耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
            下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

            Fluorescein antibody (HRP)原裝、分裝鹽苯噻嗪/泊酚雜質(zhì)J

            Saccharomyces cerevisiae antibody原裝、分裝鹽苯噻嗪/泊酚雜質(zhì)J(標(biāo)準(zhǔn)品)

            Glutathione antibody [D8]原裝、分裝N-酰神經(jīng)氨/唾液

            Prostate Specific Antigen antibody原裝、分裝N-酰神經(jīng)氨/唾液

            Cathepsin D antibody原裝、分裝N-酰神經(jīng)氨/唾液

            Creatine Kinase MB antibody [BDI937]原裝、分裝N-酰神經(jīng)氨/唾液

            Myoglobin antibody [BDI927]原裝、分裝紅

            BIRC6/APOLLON antibody原裝、分裝紅

            Human FOXG1 peptide原裝、分裝紅Dynamin 2 antibody原裝、分裝C14TKL-1

            psaF antibody原裝、分裝鹽頭孢他美酯

            PsaG antibody原裝、分裝鹽頭孢他美酯

            MSP-1 antibody原裝、分裝鹽頭孢他美酯

            PsbP antibody原裝、分裝鹽頭孢他美酯(標(biāo)準(zhǔn)品)

            PsbQ antibody原裝、分裝L-生物喋呤

            AT4G02630 antibody原裝、分裝L-生物喋呤

            thylakoid lumen proteins antibody原裝、分裝L-生物喋呤

            thylakoid membrane proteins antibody原裝、分裝渥曼青
            犬血支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格E2F1 antibody原裝、分裝N-去異基-N-基利福布汀

            Human PHD2 / prolyl hydroxylase peptide原裝、分裝25-去酰基利福噴汀

            Cytokeratin antibody原裝、分裝基利魯唑

            EGF antibody原裝、分裝N-羥基利魯唑-13C,15N2

            LPCAT1 antibody原裝、分裝利魯唑-13C,15N2

            Bestrophin 3 antibody原裝、分裝N-羥基利魯唑

            ZNF468 antibody原裝、分裝金剛胺鹽鹽-d4

            SFRS12 antibody原裝、分裝3-羥基金剛胺-d4

            Wnt5b antibody原裝、分裝4-(α,β)-羥基金剛胺-d4

             

            實驗過程:
            一、試劑準(zhǔn)備
            1. DNA模板
            2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
            3.10×PCR Buffer
            4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
            5.Taq酶
            二、操作步驟
            1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
                10×PCR buffer             5μl
                  dNTP mixl                 4μl
                  引物1(10pM)               2μl
                  引物2(10PM)              2μ
                  Taq酶(2U/μl)            1μl
                  DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
                  加ddH2O至               50 μl
               視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
            2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
            3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
            4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
            三、注意事項
            1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
            2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
            3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

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